首先人員上的規(guī)定：各級擴培人員的無菌意識要高度一致，在實驗室階段，一定嚴格按照無菌操作規(guī)程進行；生產(chǎn)現(xiàn)場擴培人員上崗前要換好指定工作服，擴培操作前要用75%酒精擦拭雙手，避免發(fā)生交叉污染。
其次，對環(huán)境要求也非常嚴格：無種室應按要求定期消毒，紫外線照射至少30min，實驗儀器應隨時在0.1MPa之下消毒20-30min；接種和添加麥汁過程之中的所有管道和閥門必須用熱水或蒸汽完全消毒。室內地面和墻面也應定期噴灑一定濃度的消毒劑進行消毒滅菌。室內空氣在接種前一天應完全消毒，接種后應進行二次消毒。
然后是擴培麥汁的要求：種子罐之前的麥汁盡量取頭號麥汁，加水調節(jié)濃度為11～120P ，滅菌要求0.1MPa，20～30min；也可經(jīng)過特殊處理后，進行干熱滅菌，要求120℃恒溫3h；現(xiàn)場擴培用麥汁為沉淀槽中的熱麥汁，濃度在120P左右，α-氨基氮應在180～220mg/L，可添加適量的酵母營養(yǎng)鹽。麥汁滅菌方法同前。
最后是壓縮空氣：用于通風和供氧的壓縮空氣，必須經(jīng)過三級膜過濾后才能使用。同時，氧氣含量要適當，酵母在氧氣不足的情況下生長緩慢，而氧氣過多會造成酵母細胞呼吸酶活性過強，酵母繁殖過多不利于后期發(fā)酵。一般來說，在進入培養(yǎng)罐之前，膨脹的培養(yǎng)酵母應該每天充氣三次，每次20-30分鐘。
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